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看完本文,对Bio-Rad_PTC-200 PCR仪有一个新认识
更新时间:2022-03-24   点击次数:1046次
   Bio-Rad_PTC-200 PCR仪可以根据不同的DNA的片段及其引物,设计不同的扩增条件,从而实现样本DNA在Taq酶的作用下达到指数性的增长。广泛应用于序列测定、遗传分析、医疗诊断等样品的前处理。
  
  PCR(聚合酶链式反应)是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链,低温(经常是60°C左右)时引物与单链按碱基互补配对的原则结合,再调温度至DNA聚合酶最适反应温度(72°C左右),DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链。PCR仪实际就是一个温控设备,能在95℃,55℃,72℃之间很好地进行温度控制。PCR扩增仪又称为PCR基因扩增仪、PCR核酸扩增仪、聚合酶链反应核酸扩增仪,是利用PCR(Polymerasechainreaction,聚合酶链反应)技术对特定DNA扩增的一种仪器设备,被广泛运用于医学、生物学实验室中,例如用于判断检体中是否会表现某遗传疾病的图谱、传染病的诊断、基因复制以及亲子鉴定等。
  
  Bio-Rad_PTC-200 PCR仪反应步骤:
  分别是:1.Denaturation2.Annealingofprimers,3.Extensionofprimers。所谓Denaturing乃是将DNA加热(至90~95℃)变性,将双股的DNA加热后转为单股DNA以做为复制的模板.而Annealing则是令Primers于一定的温度下(冷却至55~60℃)附着于模板DNA两端。最后在DNA聚合酶e.g.Taq-polymerase的作用下(加热至70~75℃)进行引物的延长Extensionofprimers及另一股的合成。
  
  PCR的最早设想核酸研究已有100多年的历史,二十世纪60年代末、70年代初人们致力于研究基因的体外分离技术,Korana于1971年最早提出核酸体外扩增的设想:"经过DNA变性,与合适的引物杂交,用DNA聚合酶延伸引物,并不断重复该过程便可克隆tRNA基因"。
  
  PCR技术的本质是体外核酸扩增,加热使双链DNA解开螺旋,在退火温度条件下引物同模板DNA杂交,在TaqDNA聚合酶,dNTPs,Mg2+和合适pH缓冲液存在条件下延伸引物,重复“变性→退火→引物延伸”过程至25~40个循环,呈指数级扩大待测样本中的核酸拷贝数。