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在选择ABI_7500荧光定量PCR仪时需要考虑哪些问题?
更新时间:2022-05-27   点击次数:1305次
     ABI_7500荧光定量PCR仪操作方便、运行速度快、实验结果准确,从不常见设备变成分子生物学实验室的基础设备。随着PCR技术的成熟运用,多重扩增越来越热闹,荧光定量PCR仪也不能幸免。该仪器发展到如今各个厂家都推出4通道、5通道甚至6通道荧光定量PCR仪,眼花缭乱的选择让人无所适从,就有人一不小心走进了“通道越多越好”的误区。
  
  在使用有些厂家5通道的荧光定量仪时,为了确保实验结果的精确性和准确性都要在实验中使用ROX(一种荧光染料)或专用的Referencedye,这些荧光染料都必须单独使用一个检测通道。这样以来,真正能检测多重PCR荧光信号的有效通道只有4个,而且使用校正染料可能会增加后期的使用成本。有的荧光定量PCR的检测通道是只为自已厂家的专用的荧光染料或试剂开放的,有效检测通道也绝非像宣传资料中宣称的那么多。在购买前确认荧光定量PCR仪器的有效检测通道尤为重要,不能单单只听宣传。
  
  考虑多重ABI_7500荧光定量PCR仪的通道数的时候也应该从实验室实际情况出发,多重PCR并非人人适用、人人可用,因为多重PCR必须要对退火温度进行优化,在引物设计的时候就可能开始考虑能不能放在一个反应体系内进行反应,不同的反应需要的退火温度不同,不合适的退火温度会降低扩增效率,放大非特异性扩增,甚至扩增不出来,它使实验指数倍的复杂化了。临床上因为有试剂厂家专门针对某些疾病开发研制的多重检测试剂盒,才需要用到3、4、5通道的检测;科研用的荧光定量因为设计探针麻烦,基本上都用染料法,基本上单通道就能满足。